Diseño y Evaluación de un ensayo diagnóstico para la detección del ADN del VIH-1

GARIGLIO, ROSANA; TABORDA, MIGUEL A.; GIRI ADRIANA ANGELICA

Paraná

Congreso; I Congreso Nacional de SIDA; 2007

Sociedad Argentina Interdisciplinaria de SIDA

En este trabajo se presenta el desarrollo de un método diagnóstico para la detección del ADN de VIH-1 y evaluación de la performance para su uso como herramienta diagnóstica en individuos de la región. El método se basa en purificación del ADN genómico de células mononucleares de sangre periférica mediante lisis diferencial, amplificación por PCR y detección de amplicones mediante hibridización líquida y revelado colorimétrico. La evaluación se efectuó con 648 muestras representativas de distintas poblaciones con diagnóstico previo de infección por el VIH-1 (357 positivas y 291 negativas). El valor de corte se estableció con estudios de performance y curva ROC. El método presentó un límite de detección de 9 copias de ADN de VIH/reacción, sensibilidad clínica de 98,87% [IC (95%): 98,72-99,02] y especificidad total de 98,78% [IC (95%):98,57-98,99]. No hubo reactividad cruzada con otras patologías ni interferencia endógena por aumento de metabolitos en concentraciones patológicas. El VPP fue 36,4% [IC (95%): 31,4-41,4]  y el VPN fue 99,9% [IC (95%): 99,5-100,3]. El CV inter-ensayo fue 9,3% para 12,5 copias ADN/reacción.El método presenta excelente performance, es de fácil manipulación, estable y no requiere instrumental ni laboratorios de alta complejidad. Su aplicación resultaría relevante como marcador de remisión cuando se disponga de terapias que efectivamente erradiquen la infección.