IBR   13079
INSTITUTO DE BIOLOGIA MOLECULAR Y CELULAR DE ROSARIO
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
CNBP reconoce ácidos nucleicos con regiones desapareadas ricas en guanina.
Autor/es:
NASIF, S.; CALCATERRA, N.B.; ARMAS, P.
Lugar:
Huerta Grande, Córdoba, Argentina.
Reunión:
Congreso; Primera Reunión Conjunta de Sociedades de Biología de la República Argentina.; 2007
Institución organizadora:
Sociedades de Biología de la República Argentina.
Resumen:
Introducción: La proteína celular de unión a ácidos nucleicos
(CNBP) es una pequeña proteína altamente conservada entre vertebrados esencial
para el desarrollo embrionario normal de estructuras craneofaciales. CNBP
reconoce ácidos nucleicos de cadena simple y tiene actividad de chaperona de
ácidos nucleicos. Objetivo: Dado que los blancos moleculares de CNBP no
han sido aún completamente identificados se plantea analizar los requerimientos
de secuencia y/o estructura secundaria de ácidos nucleicos de simple hebra para
ser reconocidos por CNBP.
Metodología: Los ADNc de CNBP de Bufo arenarum y Danio
rerio se utilizaron para ser expresados en E. coli y ser purificados
como proteína de fusión a Glutatión S-Transferasa (GST). Se ensayó la
unión de GST-CNBP a ácidos nucleicos de simple hebra por ensayos de retardo de
la movilidad electroforética (EMSA).
Resultados
y Discusión: La
interacción de GST-CNBP con sondas de ADN de simple hebra diseñadas sobre la
secuencia de un blanco conocido de unión de CNBP (región 5 no traducida del
ARNm de la proteína ribosomal L4 de Xenopus lavéis) mostró que CNBP
tiene preferencia de unión por ácidos nucleicos con regiones ricas en
nucleótidos de guanina no apareados. Además el análisis de la interacción con
sondas homopolimericas nos permitió proponer que la interacción depende de
restricciones espaciales mediadas por la estructura secundaria de las sondas.