IBR   13079
INSTITUTO DE BIOLOGIA MOLECULAR Y CELULAR DE ROSARIO
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
CNBP reconoce ácidos nucleicos con regiones desapareadas ricas en guanina.
Autor/es:
NASIF, S.; CALCATERRA, N.B.; ARMAS, P.
Lugar:
Huerta Grande, Córdoba, Argentina.
Reunión:
Congreso; Primera Reunión Conjunta de Sociedades de Biología de la República Argentina.; 2007
Institución organizadora:
Sociedades de Biología de la República Argentina.
Resumen:
Introducción: La proteína celular de unión a ácidos nucleicos (CNBP) es una pequeña proteína altamente conservada entre vertebrados esencial para el desarrollo embrionario normal de estructuras craneofaciales. CNBP reconoce ácidos nucleicos de cadena simple y tiene actividad de chaperona de ácidos nucleicos. Objetivo: Dado que los blancos moleculares de CNBP no han sido aún completamente identificados se plantea analizar los requerimientos de secuencia y/o estructura secundaria de ácidos nucleicos de simple hebra para ser reconocidos por CNBP. Metodología: Los ADNc de CNBP de Bufo arenarum y Danio rerio se utilizaron para ser expresados en E. coli y ser purificados como proteína de fusión a Glutatión S-Transferasa (GST). Se ensayó la unión de GST-CNBP a ácidos nucleicos de simple hebra por ensayos de retardo de la movilidad electroforética (EMSA).   Resultados y Discusión: La interacción de GST-CNBP con sondas de ADN de simple hebra diseñadas sobre la secuencia de un blanco conocido de unión de CNBP (región 5’ no traducida del ARNm de la proteína ribosomal L4 de Xenopus lavéis) mostró que CNBP tiene preferencia de unión por ácidos nucleicos con regiones ricas en nucleótidos de guanina no apareados. Además el análisis de la interacción con sondas homopolimericas nos permitió proponer que la interacción depende de restricciones espaciales mediadas por la estructura secundaria de las sondas.