Regulación de la expresión génica del gen Chka durante la diferenciación neuronal inducida por AR.

DOMIZI, P AND BANCHIO C

Santa Fe

Jornada; VI Jornadas de Bioquimica y Biologia Molecualr de Lipidos; 2014

Una de las principales características de la diferenciación neuronal es la formación de neuritas. Para ello se requiere de la síntesis de novo de membrana. Durante la diferenciación inducida por ácido retinoico (AR), el aumento en la biosíntesis de fosfatidilcolina (PC), es sostenido, en parte, por la inducción de la expresión del gen Chka, por lo que nos planteamos dilucidar los mecanismos por los cuales el AR induce su expresión. Mediante análisis de fusiones reportera del promotor de Chka identificamos la mínima región necesaria para su respuesta al AR. La misma está compuesta por dos cajas denominadas Box 1 y Box 2. Hemos demostrado que el AR, mediante ERK1/2, aumenta los niveles de C/EBP, lo que promueve su reclutamiento sobre el Box1 e induce la expresión del gen Chka. Por su parte, el Box 2 está constituido por una secuencia palindromica, la cual no ha sido previamente caracterizada. Ensayando construcciones reporteras mutantes del promotor de Chka pudimos establecer que el Box 2 es responsable del 70% de su inducción por AR. Además, mediante ensayos de EMSA pudimos determinar que sobre el Box 2 se forma un complejo proteico, y actualmente estamos realizando ensayos con el fin de poder identificar a estas proteínas. En conclusión, para que el promotor de Chka sea capaz de responder al AR se requiere del Box 1 y Box 2. Ambos, mediantes diferentes mecanismos, modulan su activación, permitiendo un incremento en los niveles de PC, necesarios durante la diferenciación.