IBR   13079
INSTITUTO DE BIOLOGIA MOLECULAR Y CELULAR DE ROSARIO
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Caracterización molecular de chaperones cloroplásticos del tipo Hsp100 de Arabidopsis thaliana
Autor/es:
ROSANO, G. L.; CECCARELLI, E. A.
Lugar:
Huerta Grande, Argentina
Reunión:
Congreso; 1º Reunión Conjunta de Sociedades de Biología de la República Argentina; 2007
Institución organizadora:
Sociedades de Biología de la República Argentina
Resumen:
En cloroplastos de A. thaliana se han identificado chaperonesde la familia Hsp100, conformada por tres miembros: ClpC1,ClpC2 y ClpD. Estas proteínas llevarían a cabo diversos rolescomo asistir en el plegado, mantenimiento e importe deproteínas cloroplásticas. Los objetivos de este trabajo sonobtener en forma recombinante los chaperones y estudiar sufunción in vitro. Los cADN se obtuvieron del banco de cADNde A. thaliana RIKEN, se amplificaron por PCR y se clonaronen el vector de expresión pET28a. ClpC2 y ClpD fueronexpresadas y purificadas a homogeneidad por cromatografíade afinidad con resina de níquel-NTA-agarosa. En estudioscinéticos, se estableció su actividad ATPasa basal y en funcióndel pH y cationes divalentes, así como estimulación enpresencia de péptidos de estructura desordenada. Por su parte,no se logró la expresión de ClpC1 ya que causa crecimientoretardado y muerte celular al huésped de expresión, lo cual seevidenció por experimentos de curva de crecimiento y conteode células viables en placa.