IBR   13079
INSTITUTO DE BIOLOGIA MOLECULAR Y CELULAR DE ROSARIO
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Detección de Pseudomonas aeruginosa productoras de metalo betalactamasas en muestras clínicas
Autor/es:
LARIOS-MONDRAGÓN, L.; GALICIA-VELASCO, M.; BERMEJO-MORALES, K.; ADRIANA SARA LIMANSKY; QUIÑONES-FALCONE, F.
Lugar:
Aguascalientes
Reunión:
Congreso; Congreso Anual de la Asociación Mexicana de Infectología y Microbiología Clínica.; 2007
Resumen:
El objetivo del trabajo ha sido evaluar métodos fenotípicos para la detección de metalo betalactamasas( MBLs) en Pseudomonas aeruginosa. Para ello se incluyeron 433 cepas de Ps. aeruginosa aisladas de muestras clínicas durante el periodo de Enero del 2005 a Septiembre del 2006. Se incluyeron todas aquellas cepas resistente a los carbapenems ( CIM > 8 µg/µl ), las cuales fueron evaluadas por los siguientes métodos: SINERGIA CON DISCO DE EDTA (SDE). Las cepas fueron inoculadas en agar Mueller-Hinton  con un disco de imipenem (10ug) y otro de EDTA 0.5M  (10ul )  a una distancia de 10mm. Se incubaron a 37ºC por 24 hrs. La inhibición del crecimiento entre ambos discos se interpretó como productor de  MBLs. SINERGIA CON DOBLE DISCO DE IMP (SDDI). Se colocaron dos discos de imipenem (10ug),  uno de ellos impregnado con 10ul de EDTA 0.5M  y se incubaron a 37ºC por 24 horas. El incremento mayor a  7mm en la zona de inhibición del disco impregnado con EDTA se interpretó como productor de MBLs.  SINERGIA CON EXTRACTO ENZIMATICO (SEE).  Después de obtener el crecimiento de un cultivo se diluyó en Tris-HCl  y se sometió a diez ciclos de choques térmicos (-20ºC a 37ºC) y se procedió a extraer el sobrenadante. Se inoculó  la cepa E.coli ATCC 25922 en agar Mueller-Hinton  y se colocaron cinco discos en el siguiente orden a) IMP (10ug) y en el contorno de este los discos de  b) extracto enzimático (20ul), c) la mezcla del extracto enzimático y sulfato de zinc (20ul ),  d) una mezcla del extracto enzimático y EDTA 0.5M  ( 20 ul ) y  e) un disco con 20ul de buffer Tris HCL. El crecimiento alrededor de los discos b) y c) y la ausencia del mismo en el disco d) y e) se interpretó como productor de MBLs. Esta técnica fue considerada el estándar ideal. La técnica de SDE tuvo la menor sensibilidad de las técnicas evaluadas, la técnica del doble disco de IMP tiene una sensibilidad aceptable, sin embargo mostró una proporción alta de resultados falsos positivos ( VPP 0.16 ) . Considerando los hallazgos de este estudio Este estudio confirma los hallazgos de Limansky  y cols. Que re reportan una sensibilidad y especificidad del 100% del método de extracto enzimático cuando se evaluó contra técnicas moleculares. Esta técnica es de bajo costo,  relativamente simple  y debe ser considerada el método de detección de MBLs en los laboratorios clínicos.