IBR   13079
INSTITUTO DE BIOLOGIA MOLECULAR Y CELULAR DE ROSARIO
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
lA SOBREEXPRESIÓN DEL FACTOR CON bROMODOMINIO 1 DE TRYPANSOMA CRUZI ES DELETEREA PARA SU CRECIMIENTO
Autor/es:
RITAGLIATI, CARLA; CRIBB PAMELA; SERRA ESTEBAN
Reunión:
Congreso; XXVI Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Portozoología; 2013
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Portozoología
Resumen:
La sobre expresión del Factor con Bromodominio 1 de Trypanosoma cruzi es deletérea para su crecimiento. Carla Ritagliati, Pamela Cribb, Esteban Serra Laboratorio de Biologia y Bioquimica de Trypanosoma cruzi, IBR-CONICET, FCByF-UNR. ritagliati@ibr-conicet.gov.ar. En los últimos años los avances en espectrometría de masas permitieron detectar gran número de proteínas acetiladas, distribuidas en los distintos compartimientos celulares e involucradas en una variedad de procesos. Sorprendentemente, estudios tanto en bacterias como en humanos han reportado que el 90% de las enzimas metabólicas están acetiladas y que cambios en la disponibilidad de nutrientes altera el perfil de acetilación y la actividad enzimática. Estos resultados sugieren un alto poder regulatorio de la acetilación que lleva a compararla con la fosforilación de proteínas. El bromodominio, es el único dominio proteico que une lisinas acetiladas. Esta presente casi exclusivamente en proteínas de localización nuclear. En T. cruzi se han detectado mediante métodos bioinformáticos cinco CDS con bromodominios. La proteína TcBDF1 presenta un bromodominio entre los aminoácidos 30 y 115. Su porción C-terminal es una zona poco estructurada característica de interacción con otras proteínas. En epimastigotes, TcBDF1 se localiza principalmente fuera del núcleo, y se concentra en los glicosomas, para lo cual posee una secuencia de señalización en su extremo N-terminal. En este trabajo se obtuvieron mutantes en los aminoácidos claves para la interacción con el residuo de acetil lisina, de modo que el complejo formado no sea capaz de unir su diana acetilada. Se utilizó el vector para expresión inducible por Tetraciclina pTcIndex-GW. En parelelo, se construyó el plásmido con la forma salvaje de TcBDF1. A estas construcciones se les fusionó un tag HA para su inmunodetección. Se corroboró la sobreexpresión por IFI y WB a distintas concentraciones de tetraciclina. Luego, realizamos una curva de crecimiento, para analizar efectos en el crecimiento y la morfología. La sobreexpresión de TcBDF1 Y102A/V109A (doble mutante) resultó deletérea.