Regulación hormonal de la glicoproteína deleted in malignant brain tumor 1 (DMBT1) en células epiteliales de oviducto porcino.

M. LORENA ROLDÁN; PATRICIA E. MARINI

Zaballa

Congreso; XV Congreso y XXXIII Reunión Anual - Sociedad de Biología de Rosario (SBR); 2013

Sociedad de Biología de Rosario (SBR)

Entre los eventos relacionados a la interacción materno-gametas masculinas se dan relaciones que producen selección de espermatozoides y, por lo tanto, contribuyen de manera indirecta al control de la polispermia. La polispermia es el principal inconveniente notado en la inseminación artificial y la fecundación in vitro en cerdos. Antes del encuentro de las gametas en el sitio de fecundación, los espermatozoides son seleccionados por el oviducto, por un lado mediante la formación de un reservorio, en el que permanecen en forma quiescente y del que se liberan en número apropiado en coordinación con la ovulación; y por otro lado por selección negativa. En este último mecanismo se propone que la interacción de los espermatozoides que han comenzado el proceso de capacitación con la glicoproteína DMBT1, anteriormente denominada sperm binding glycoprotein (SBG), produciría alteración acrosomal en los espermatozoides localizados en la zona de la luz y principalmente en el istmo del oviducto. A su vez produce una disminución de la motilidad y fosforilación en residuos de tirosina de AKAP-4. DMBT1 se localiza en la superficie apical de las células epiteliales en el lumen del oviducto lo que concuerda con la localización de espermatozoides que poseen alteraciones en sus acrosomas in vivo. Se ha reportado que la expresión de DMBT1 es dependiente de progesterona y estradiol en endometrio de monos, ratas y en oviducto de vaca. La hembra de cerdo es poliéstrica anual y su ciclo sexual se repite cada 21 días. El ciclo sexual se puede dividir en fase folicular, fase lútea y fase ovulatoria. La progesterona gobierna principalmente durante la fase lútea, mientras que en la fase folicular se puede considerar que predomina el estrógeno. Nos propusimos analizar una posible dependencia de los niveles de expresión de DMBT1 con la presencia de hormonas ováricas en oviducto porcino, a fin de establecer una vinculación entre la expresión de la glicoproteína y el ciclo estral. El análisis inmunohistoquímico de los oviductos porcinos correspondientes a las fases folicular y lútea (estimadas mediante la observación de los correspondientes ovarios) no mostró diferencias respecto a la localización, pero si una mayor intensidad de la fluorescencia en la fase folicular, tanto en el citoplasma como en la membrana plasmática. Dado que la inmunohistoquímica no es una técnica de cuantificación, se simuló el ciclo estral de la cerda con concentraciones plasmáticas fisiológicas de progesterona y estradiol en monocapas de células epiteliales de oviducto porcino, y se procedió al análisis mediante western blot. Se observó que a la mayor concentración de β-estradiol utilizada hay un aumento en la expresión de DMBT1. Esto coincide con lo observado mediante ensayos inmunohistoquímicos. Estos resultados estarían indicando que DMBT1 aumenta sus niveles de expresión antes y en el inicio de la ovulación, que se correspondería a la fase folicular tardía y coincidiría con lo previamente reportado en oviductos bovinos. Es posible que tal incremento permita mayor interacción de esta glicoproteína con los espermatozoides, contribuyendo a la prevención de la polispermia, solo en el momento del ciclo hormonal previo al encuentro entre las gametas.