Estudio de la expresión de chaperones moleculares en plantas sometidas a estrés biótico y abiótico

GAROFALO, C.G.,; GARVAGALIA, B.S.,; ORELLANO, E.G.; OTTADO J.

Rosario

Congreso; XXVI Reunión Anual de la Sociedad de Biología de Rosario; 2006

Sociedad de Biología de Rosario

En las interacciones planta-patógeno, la inmunidad de las plantas está mediada por proteínas R que permiten el reconocimiento de moléculas específicas del patógeno (Avr, proteínas de avirulencia). La activación de la resistencia generalmente induce la respuesta hipersensible (HR) caracterizada por una muerte celular programada en el sitio inicial de infección. Estudios recientes sugieren que la resistencia mediada por proteínas R es dependiente del chaperón molecular Hsp90, y que Hsp90 y Hsp70 cumplirían roles esenciales en la transducción de señales en la activación de la HR. También se observó que chaperones de la familia Hsp70 se inducen frente a la infección de plantas por virus. La bacteria fitopatógena Xanthomonas axonopodis patovar (pv.) citri (Xac), responsable de la cancrosis de los cítricos, es capaz de inducir HR en plantas no hospedadoras. El objetivo de este trabajo es analizar la expresión de Hsp70 en plantas sometidas a estrés térmico y en la interacción con Xac. Para estos experimentos, plantas de naranja y pimiento crecidas a 25 ºC fueron sometidas a temperaturas de 5, 15, 37 y 47 ºC. A distintos tiempos, (30, 60, 120 y 240 minutos) se congeló el material en nitrógeno líquido y se prepararon extractos proteicos de las hojas, que fueron sometidos a electroforesis en geles de poliacrilamida desnaturalizantes. Posteriormente fueron transferidos a membranas de nitrocelulosa y revelados utilizando anticuerpos anti-Hsp70. Se observó que la proteína Hsp70 se induce durante el tratamiento a altas temperaturas mientras que a temperaturas menores de 25 ºC el nivel de expresión de Hsp70 es similar al de los controles. A fin de evaluar la expresión de Hsp70 en la cancrosis de los cítricos, se infiltraron plantas de naranja utilizando suspensiones bacterianas de Xac de 107 UFC/ml. A distintos tiempos (8, 24, 48, 72 horas; 7 y 10 días) se prepararon las muestras y se procedió igual que con los experimentos de estrés térmico. En esta interacción plantapatógeno compatible no se observó inducción en los niveles de Hsp70 en los tiempos ensayados. Los resultados obtenidos sugieren que a diferencia de lo reportado para infecciones por virus, en la interacción compatible de Xac con plantas de naranja no se induce la expresión de Hsp70.