EL CALCIO Y EL BICARBONATO SON ESENCIALES PARA LA CAPACITACIÓN ESPERMÁTICA MEDIADA POR HEPARINA EN PORCINOS.

DORA DAPINO; FERNANDO CANE; PATRICIA ESTELA MARINI; MARCELO O CABADA

Casilda, Santa Fe

Jornada; Jornadas de Divulgación Técnico Científicas - Facultad de Cs. Veterinarias; 2006

Facultad de Ciencias veterinarias, UNR

Los espermatozoides de mamíferos adquieren capacidad fecundante luego de su residencia en el oviducto durante cierto tiempo, donde experimentan el proceso de capacitación y posterior  reacción acrosómica, en respuesta a secreciones  del oviducto  y a ciertos componentes de la zona pelúcida. La capacitación espermática puede ser desencadenada in Vitro mediante la incubación de espermatozoides en medios que semejan en su composición a los fluidos oviductales. Si bien no existe un medio de capacitación universal, en todos ellos parece ser esencial la presencia de componentes como albúmina bovina (BSA), calcio y bicarbonato (3). En trabajos anteriores hemos observado un aumento adicional de los valores de capacitación de espermatozoides porcinos incubados en un medio capacitante (TALP) durante 120 minutos a 39ºC, cuando se suplementan dichos medios con heparina hasta una concentración final de 10 µg/ml. Con el objeto de determinar la posible interacción  de la heparina con estos componentes (BSA, Ca2+ y HCO3-) se procedió a incubar muestras de espermatozoides provenientes de 6 verracos adultos en los siguientes medios: capacitante TALP (MC), no capacitantes: (NC) TALP - BSA - Ca2+ - HCO3-  y combinaciones como NC + Ca2+, NC+ HCO3-  y  NC + Ca2+  +  HCO3-, en presencia  (10 µg/ml ) o ausencia de heparina. La capacitación se estimó mediante la tinción con Clortetraciclina (CTC) contándose 200 células por preparado. Se determinó mediante ANOVA, que los valores de capacitación en los medios NC,  NC + Ca2+ y NC+ HCO3- no difieren significativamente, incluso en presencia de heparina (p>0.05)  y sí se observan diferencias significativas entre los medios MC y NC + Ca2+ +  HCO3- con respecto a los demás medios testeados (p<0.001). La adición de heparina en dichos medios aumenta significativamente el número de espermatozoides capacitados con respecto a los mismos medios sin heparina (p< 0,05). Se concluye que la presencia  de heparina en medio capacitante aumenta los valores habituales de capacitación, siendo indispensable la presencia de calcio y bicarbonato para el proceso. En especies como humanos y roedores, se ha demostrado que BSA cumple un rol fundamental en el comienzo del proceso de capacitación sustrayendo el colesterol de la membrana y aumentando la fluidez de la misma (1; 2). En el cerdo, no ha sido descripto un eflujo de colesterol de este tipo durante la capacitación. En este trabajo, el hecho de que la ausencia de BSA en el medio de incubación no mostrara diferencias en el porcentaje de espermatozoides capacitados con respecto al medio completo (CM) corrobora reportes previos  que sugieren que BSA no es esencial para el proceso de capacitación en el cerdo (2). Recientemente se ha demostrado la presencia de glucosaminoglucanos sulfatados del tipo heparina en oviducto de cerdo hembra y han sido observadas variaciones en su concentración de acuerdo al momento del ciclo estral; lo que  sugiere que estos compuestos podrían tener un rol importante en el proceso de fecundación en esta especie.   Bibliografía:   Cross N., 1998. Role of cholesterol in sperm capacitation. Biol. Reprod. 59, 7-11. Tardif S., Dubé C., Bailey J., 2003. Porcine sperm capacitation and tyrosine kinase activity are dependent on bicarbonate and calcium but protein tyrosine phosphorylation is only associated with calcium. Biol. Reprod. 68, 207-213. 3.       Visconti P., Kopf G., 1998. Regulation of protein phosphorylation during sperm capacitation. Biol. Reprod. 59, 1-6.