Implicancias de la formación de biofilm en la supervivencia de Xanthomonas axonopodis pv citri en hojas de limón

RIGANO L; SICILIANO F; SENDIN, L.; BIAZUTTI, A. A.; BERMEJO, C.; TORRES, P.; MALAMUD, F.; CASTAGNARO A; MARIA ROSA MARANO; VOJNOV A.A

Chascomús. Bs. As.

Congreso; XXVI Reunión de Fisiología Vegetal; 2006

Xahthomonas axonopodis pv. citri (Xac), es el agente responsable de la enfermedad cuarentenaria conocida como cancrosis de los cítricos, que afecta a plantaciones en todo el mundo. El objetivo de este trabajo fue estudiar si existe alguna relación entre la capacidad de este patogeno de formar un biofilm funcional y su “fitness” epifítico, o sea la capacidad de sobrevivir en un ambiente hostil (como la superficie de la hoja del citrico), aspecto que es clave en el proceso de infección de la planta. Para ello desarrollamos una mutante de Xac incapaz de producir el exopolisacárido xantano, ya que se ha descripto que en otras especies bacterianas el exopolisacárido es necesario para la formación de biofilm. Específicamente se interrumpió la secuencia codificante del gen gumB mediante la inserción de un “cassete” dando origen a la cepa Xac ∆gumB. Se estudió a esta mutante y a la cepa silvestre mediante microscopía confocal en cámaras de borosilicato, y se determinó que la cepa Xac ∆gumB esta afectada en su capacidad de formación de biofilm en relación con la cepa silvestre Xac, brevemente, esta cepa mutante no forma estructuras tridimensionales del tipo “biofilm” característicos de la cepa silvestre, sino que se adhiere a la matriz de forma desordenada no observándose interacción importante entre bacterias. De manera interesante la cepa Xac ∆gumB es reducida en patogenicidad en hojas de citrico comparado con la cepa silvestre, evidenciando un menor crecimiento y una casi nula aparición de síntomas. En estudios de crecimiento epifítico sobre hojas de limon la cepa mutante incapaz de formar biofilm muestra una sobrevida mucho menor que Xac. Mediante microscopía confocal se pudo apreciar que en la superficie de hojas de limon Xac forma estructuras de biofilm similares a las que se observan “in vitro” mientras que la cepa mutante no forma ningún tipo de estructuras sobre hoja, de manera similar a su conducta “in vitro”. Estos resultados sugieren que la formación de biofilm es una conducta importante que este patógeno posee para sobrevivir en la superficie de la hoja a la espera de poder ingresar en la planta.