IBR   13079
INSTITUTO DE BIOLOGIA MOLECULAR Y CELULAR DE ROSARIO
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Efecto diferencial del Benznidazol (BZL) sobre la activación de NF-B y AP-1 en células RAW 264.7.
Autor/es:
MANARIN, ROMINA; PASCUTTI, FERNANDA; REVELLI, SILVIA; SERRA ESTEBAN
Lugar:
Mar del Plata
Reunión:
Congreso; LIV Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Inmunología; 2006
Institución organizadora:
SAI
Resumen:
  El BZL se utiliza actualmente como parasiticida en el tratamiento de la Enfermedad de Chagas. En trabajos previos, hemos demostrado que este compuesto posee, además, actividad anti-inflamatoria al inhibir la producción de mediadores pro-inflamatorios inducida por LPS, tanto in vivo como in vitro, en la línea de macrófagos murinos RAW 264.7, inhibiendo la activación de NF-kB en respuesta a LPS al impedir la degradación de IkBa. NF-kB puede ser activado por numerosos inductores, y se postula que las vías convergen a nivel de IKK. Además, su activación se encuentra frecuentemente coordinada con la de otros factores de transcripción como AP-1. El objetivo de este trabajo fue ahondar en los mecanismos moleculares por los cuales el BZL inhibe la activación de NF-kB. Para ello, células de la línea RAW 264.7 se transfectaron con un plásmido que contiene el gen reportero luciferasa bajo el control de elementos kB y luego se incubaron con diferentes inductores (LPS, IL-1, FNT-a, PMA y H2O2) con o sin BZL 0.1 y 1 mM durante 24 hs, para luego determinar la actividad luciferasa en los extractos totales. Esto permitió evidenciar un aumento de la actividad luciferasa en respuesta a todos los inductores, que disminuyó en forma significativa en los cultivos tratados con BZL 1 mM. Estos resultados se confirmaron por ensayos de retardo en gel (ERG). Además, con el fin de evaluar la selectividad del BZL, se estudió la activación de AP-1 en extractos nucleares de células RAW 264.7 estimuladas con LPS y tratadas con BZL 0.1 y 1 mM. A través de ERG se observó la aparición de una banda específica en respuesta a LPS, cuya intensidad no disminuyó frente al tratamiento con BZL. De los resultados obtenidos se desprende que el BZL inhibe en forma específica la activación de NF-kB, sin modificar la activación de AP-1, y que este efecto es independiente de la vía de inducción, lo que sugiere que la inhibición podría encontrarse a nivel de la activación de IKK o de la actividad del proteosoma.