dsRBDs en el procesamiento de miARNs en plantas

BURDISSO P; SUAREZ IP; RASIA RM

Buenos Aires

Congreso; XL Reunión Anual Sociedad Argentina de Biofísica; 2011

Sociedad Argentina de Biofísica

Los miARNs cumplen funciones importantes en la regulación post transcripcional en organismos superiores. Se trata de molécular pequeñas de ARN simple hebra (21-22 nt) que inhiben la traducción de ARNm a partir de complementariedad de bases con los mismos en el conexto del complejo multiproteico RISC. Los miARNs se originan en transcriptos endógenos más largos llamados pri-miARNs que tienen una estructura de hebilla. Para asegurar el silenciamiento de los mARNs correctos es crítico que la digestión de los precursores sea precisa. En plantas, los dos cortes necesarios para liberar el miARN de su precursor son llevados a cabo por un complejo formado por las proteínas HYL1, DCL1 y SERRATE. El reconocimiento del pri-miARN por este complejo es mediado por varios dominios de unión a ARN presentes en estas proteínas. Hemos investigado la estructura y la función de los cuatro dominios dsRBD que se encuentran en el complejo de procesamiento: dos de DCL1 y dos de HYL1. Hallamos que si bien ambos dominios de HYL1 tienen un plegamiento canónico de dsRBD, solamente el primero participa en el reconocimiento del sustrato. Determinamos que residuos de esta proteína están involucrados en la interacción con el ARN y mostramos que resultan esenciales para su función in vivo. En DCL1, observamos que el primer dsRBD no se pliega en forma independiente pero adquiere un cierto grado de plegamiento en presencia de ARN doble hebra. El segundo dsRBD de DCL1 no es canónico y une tanto ARN como ADN doble hebra. En conjunto nuestras observaciones demuestran que la función de los dsRBD de la maquinaria de procesamiento de miARN en plantas va más allá del reconocimiento de los precursores. 1. Rana TM, Nat Rev Mol Cell Biol, 8, 23-36 (2007) 2. Xie Z, Khanna K, Ruan S, Semin Cell Dev Biol, 21, 790-7 (2010) 3. Rasia RM, Mateos J, Bologna NG, Burdisso P, Imbert L, Palatnik JF, Boisbouvier J, Biochemistry. 49, 8237-8239 (2010) Agradecimientos: el trabajo fue financiado por ANPCyT (pict 2007-720) y CONICET.