IBR   13079
INSTITUTO DE BIOLOGIA MOLECULAR Y CELULAR DE ROSARIO
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Transducción de señales mediada por sistemas a dos componentes: proteínas alostéricas en movimiento
Autor/es:
TRAJTENBERG, FELIPE; ALBANESI, DANIELA; LARRIEUX, NICOLE; ALZARI, PEDRO; DE MENDOZA, DIEGO; BUSCHIAZZO, ALEJANDRO
Lugar:
Buenos Aires
Reunión:
Congreso; XL Reunión Anual, Sociedad Argentina de Biofísica; 2011
Resumen:
DesK es una histidin-kinasa (HK) transmembranaria de Bacillus subtilis, que permite a las células sensar y responder al choque frío. A pesar de que la relevancia de las HKs sensoras en transducción de señales está bien establecida, aún ignoramos los mecanismos moleculares que expliquen cómo las señales de entrada finalmente regulan las actividades catalíticas de salida de las HKs. Usando una combinación de aproximaciones estructurales y bioquímicas, hemos podido capturar a la región catalítica intracitoplasmática entera de DesK (DesKC), en tres estados conformacionales diferentes, que se corresponden con las distintas funciones de la proteína a lo largo de la via de señalización1. Observamos movimientos rotacionales y de asimetrización en las hélices centrales de DesKC, que llevan a modular la superficie accesible del sitio de fosforilación, así como la movilidad de los dominios de unión a ATP. El estado transiente de autosforilación intradimérica fue explorado in silico, usando algoritmos de docking. El modelo postulado fue validado por ingeniería de cisteinas basada en la estructura, permitiéndonos atrapar el estado intermediario como un dímero covalente2. Subsiguientes experimentos de mutagénesis confirman a su vez la importancia de la plasticidad mediada por ‘coiled-coils’, tanto in vitro como in vivo. Más recientemente, hemos determinado una serie de estructuras cristalinas correspondientes a distintos estados del regulador de respuesta específico de DesK, llamado DesR. DesR, es un factor de transcripción que activa su unión por el operador ADN cuando se fosforila. El análisis estructural sugiere que DesR sigue rearreglos de switching ‘activación/inactivación’, que parecen ser diferentes a los canónicos.1. Albanesi D., Martín M., Trajtenberg F., Mansilla M. C., Haouz A., Alzari P. M., de Mendoza D. and Buschiazzo A., Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 106, 16185-16190 (2009).2. Trajtenberg F., Graña M., Ruetalo N., Botti H. and Buschiazzo A. J. Biol. Chem., 285, 24892-24903 (2010).