Las oncoproteínas E6 de Papilomavirus humanos interfieren con la función de componentes celulares involucrados en la regulación de la polaridad celular.

FACCIUTO F, BUGNON VALDANO M, CAVATORTA AL, GARDIOL, D

Buenos Aires

Congreso; Congreso Argentino de Virología; 2011

CAV

Las proteínas E6 de Papilomavirus humanos (HPV) tienen la capacidad de interaccionar con proteínas que participan en la organización de las uniones celulares y que poseen dominios de interacción proteica denominados PDZ. Por otro lado, la pérdida de polaridad celular es un evento clave en el desarrollo de carcinogénesis y su regulación depende, en parte, de la integridad de las uniones celulares tipo tight (UT). Con el objetivo de analizar la interferencia de la proteína E6 de HPV con la estructura de las UT analizamos los niveles y distribución de componentes del complejo de polaridad celular Par, un elemento clave en este tipo de uniones, en presencia de la proteína viral E6. Mediante ensayos de inmunofluorescencia observamos que la expresión de E6 derivadas de HPV oncogénicos altera la composición de tal complejo en los bordes celulares. Asimismo, la polaridad celular también requiere la correcta distribución de lípidos de membrana de tipo fosfoinositósidos (PIP) que a su vez están involucrados en los mecanismos de traducción de señales. La proteínas celulares PDZ presentes en las UT interaccionan con este tipo de lípidos y esta interacción es relevante para la correcta distribución de PIP. Por ello, investigamos si la unión PDZ-E6 podría interferir con la localización y función de tales lípidos. Con este propósito, analizamos las diferencias en la distribución de PIP en presencia o ausencia de las proteínas E6 usando un biosensor fluorescente de PIP. Demostramos que la expresión de la proteína E6 induce una deslocalización de PIP reduciendo su presencia en los bordes celulares. Más aún, esta alteración no se observó para el caso de la proteína E6 derivada de un tipo de HPV no oncogénico que carece la capacidad de interaccionar con dominios PDZ. Además, células derivadas de carcinomas asociados a HPV mostraron un patrón totalmente alterado respecto a la localización de PIP con una distribución tipo puntillado en el citoplasma. Para analizar la importancia de estos hallazgos en el mantenimiento de la polaridad y en los mecanismos de traducción de señales de manera más fisiológica, hemos optimizado cultivos de tipo histotípicos que permiten la correcta polarización de células epiteliales in vitro. En resumen, los datos obtenidos sugieren que los HPV oncogénicos tienen la capacidad de interferir con elementos claves de la UT con probables implicancias en el mantenimiento de la polaridad celular.