LA METALOTIONEÍNA 1G (MT1G) COMO POSIBLE GEN SUPRESOR TUMORAL EN CÁNCER COLORRECTAL HUMANO

ARRIAGA J; LEVY E; ALONSO A; BRAVO A; ROCCA Y; ROBERTI M; ARIS M; GRECO A; ZUCCHINI C; MORDOH J; BIANCHINI M

Mar del Plata

Congreso; LV REUNION CIENTIFICA ANUAL (SAIC) REUNION CIENTIFICA ANUAL 2010 (SAFIS) XLII REUNION CIENTIFICA ANUAL (SAFE); 2010

Sociedad Argentina de Investigacion Clinica, Sociedad Argentina de Fisiología, Sociedad Argentina de Farmacología Experimental

Las metalotioneínas (MTs) son una familia de pequeñas proteínas ricas en cisteína, capaces de regular una gran variedad de procesos fisiológicos y fisiopatológicos asociados al estrés. Previamente demostramos  la sub-expresión de las 9 isoformas funcionales de esta familia en el epitelio de tumores colorrectales con respecto a la mucosa colónica normal, así como también hemos caracterizado su perfil de expresión en 5 líneas celulares de cáncer colorrectal. Siendo la metalotioneína 1G (MT1G) la isoforma más sub-expresada a nivel tumoral,  hemos decidido  estudiar de su posible rol pronóstico y funcional sobre los tumores colorrectales.  A nivel pronóstico, realizamos un análisis de “clustering” (agrupamiento) no supervisado sobre la expresión (medida por qRT-PCR) de las metalotioneínas en 16 epitelios microdisecados de piezas quirúrgicas tumorales, encontrando que la MT1G es la única isoforma cuyo nivel de expresión tiene una tendencia a poder diferenciar los tumores de estadíos tempranos (I y II) de los avanzados (III y IV). A nivel funcional,  sobre-expresamos  dicha proteína utilizando el vector de expresión pcDNA 3.1 en la línea celular T84,  (carente de todas las  isoformas de MTs) con el fin de determinar su  efecto  sobre la inducción de apoptosis (medida por la técnica de anexina V-FITC-FACS), sobre el ciclo celular (ioduro de propidio-FACS), proliferación celular (ensayo de MTT), el tamaño de colonias formadas y su capacidad de crecimiento libre de anclaje. Notamos que la inducción de dicha proteína produjo un aumento significativo (p=0,01) del 50% del número de células en apoptosis con respecto al control, un enlentecimiento de la curva de crecimiento celular, y  un menor número y tamaño de colonias (p=0,0002). Así, dado que la pérdida de la expresión de MT1G les conferiría a las células tumorales una mayor capacidad de crecimiento, postulamos por primera vez su papel como gen supresor tumoral en cáncer colorrectal.