CARACTERIZACIÓN IN VIVO E IN VITRO DE UN MODELO DE CÁNCER DE MAMA HUMANO TRIPLE NEGATIVO Y DE SU VARIANTE METASTÁSICA

MARÍA PAULA ROBERTI ; HÉCTOR RAMIRO QUINTÁ; JUAN MARTÍN ARRIAGA; ALICIA INÉS BRAVO; JOSE MORDOH; MARÍA MARCELA BARRIO

Mar del Plata

Congreso; LV Reunión Científica Anual (SAIC) Reunión Científica Anual 2010 (SAFIS) XLII Reunión Científica Anual (SAFE); 2010

Sociedad Argentina de Investigación Clìnica, Sociedad Argentina de Fisiología, Sociedad Argentina de Farmacología Experimental

Las variantes de cáncer de mama humano que no expresan RE, RPg ni HER-2 (triple negativas -TN), son las más agresivas y aún no se cuenta con tratamientos adecuados. La línea celular IIB-BR-G fue aislada a partir de un tumor primario humano TN y su variante metastásica (MT), generada espontáneamente luego de transplantes sucesivos en ratones nude, desarrolla metástasis (mts) en ganglios linfáticos. Nuestro objetivo fue analizar diferencias entre ambas líneas celulares evaluando in vitro e in vivo el crecimiento, capacidad invasiva, capacidad linfangiogénica y diferencias estructurales del citoesqueleto. Los tiempos de duplicación in vitro fueron de 30.5 hr para IIB-BR-G y 55.3 hr para MT. El índice clonogénico en agar blando fue mayor para MT (p<0,0001), que también presentó mayor velocidad de crecimiento in vivo que IIB-BR-G (p<0,0001). El 100% de los ratones inoculados con MT desarrollaron mts en ganglios linfáticos a las 5-6 semanas, pero no se observaron mts en el caso de IIB-BR-G, aún después de 19 semanas. Aunque IIB-BR-G presentó mayor migración in vitro, MT presentó mayor capacidad invasiva en matrigel (p<0,05), con medio de cultivo con SFB como quimioatractante. Ambas líneas celulares fueron capaces de transmigrar a través de endotelios linfáticos in vitro y mostraron expresión de VEGF-C in vivo e in vitro por RTqPCR. Se evaluaron los vasos linfáticos en los tumores (IHQ para Podoplanina), observándose para MT mayor invasión linfática local en el tumor s.c. Ambas líneas presentaron expresión del filamento intermedio Vimentina por western blot y microscopía confocal, aunque su expresión fue mayor para MT relativizada al área celular (p<0,05). Vimentina se localizó principalmente a nivel de extremidades celulares en MT por análisis de superficie 3D. La mayor capacidad invasiva de MT sugiere la secreción de metaloproteasas, factores linfangiogénicos y cambios en la estructura del citoesqueleto del tipo de transición epitelio-mesenquimal.