Estudio de una permeasa de lisina de la familia TcAAAP de Trypanosoma cruzi

CANEPA GE; CARRILLO C; MIRANDA MR; CAMARA MM; BOUVIER LA; PEREIRA CA

Ascochinga, Córdoba

Congreso; Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Protozoología; 2010

SAP

<!-- /* Font Definitions */ @font-face {font-family:Calibri; panose-1:2 15 5 2 2 2 4 3 2 4; mso-font-charset:0; mso-generic-font-family:swiss; mso-font-pitch:variable; mso-font-signature:-1610611985 1073750139 0 0 159 0;} /* Style Definitions */ p.MsoNormal, li.MsoNormal, div.MsoNormal {mso-style-parent:""; margin-top:0cm; margin-right:0cm; margin-bottom:10.0pt; margin-left:0cm; line-height:115%; mso-pagination:widow-orphan; font-size:11.0pt; font-family:Calibri; mso-fareast-font-family:Calibri; mso-bidi-font-family:"Times New Roman"; mso-fareast-language:EN-US;} @page Section1 {size:595.3pt 841.9pt; margin:72.0pt 72.0pt 72.0pt 72.0pt; mso-header-margin:36.0pt; mso-footer-margin:36.0pt; mso-paper-source:0;} div.Section1 {page:Section1;} --> Los procesos de transporte son particularmente relevantes en organismos parásitos ya que durante la evolución han reemplazado rutas biosintéticas por sistemas de transporte de nutrientes. Una de las familias génicas de transportadores más numerosa en el genoma de  Trypanosoma cruzi, ha sido caracterizada en nuestro laboratorio. Dentro de esta familia, denominada TcAAAP, se ha identificado un gen (TcAAAP545) que codifica para una permeasa específica de lisina. Este dato marca una importante diferencia con los eucariotas superiores, ya que los tripanosomátidos parecen tener completamente separados los sistemas de transporte de aminoácidos básicos, arginina y lisina. Utilizando un sistema de complementación en levaduras se pudo identificar al gen que codifica para la permeasa y mediante la sobre-expresión en epimastigotes de T. cruzi se confirmó su especificidad de sustrato. Ensayos de competición con otros aminoácidos utilizando tanto parásitos salvajes como aquellos que sobre-expresan a TcAAAP545, permitieron demostrar que el ingreso de lisina es específico. Utilizando fusiones de TcAAAP545 con GFP se pudo determinar que el transportador no se encuentra distribuido en la membrana plasmática como se esperaba sino que está concentrado en una estructura compatible con el bolsillo flagelar. Con un abordaje similar hasta el presente hemos logrado identificar cuatro permeasas adicionales de la misma familia.