Los componentes de los cuerpos de procesamiento (PBs) se distribuyen diferencialmente en neuronas maduras

LUCHELLI L; BAEZ, MV; BOCCACCIO, GL

Huerta Grande, Córdoba, Argentina.

Taller; X Taller Argentino de Neurociencias; 2008

Se ha descripto la existencia de numerosos ARNm los cuales son transportados silenciados a las sinapsis en forma de ribonucleopartículas (RNPs) o gránulos de RNA. Frente a un estimulo sináptico, el transporte de mRNAs incrementa y se dispara su traducción. Estos procesos están regulados por un número creciente de RNA Binding proetein (RBP) que forman gránulos de RNA. Al volver al estado de reposo, se recuperan los niveles basales de expresión de los mRNAs previamente activados. Se desconoce cual es la contribución de la degradación de ARNm y de la recaptura y almacenamiento al silenciamiento postactivación. Hipotetizamos que los gránulos de RNA formados por las distintas RBP están relacionados con los cuerpos de procesamiento de mRNA conocidos como “Pbodies” (PB). Los PB son foci citoplasmáticos que silencian y degradan ARNm. Estos foci de silenciamiento son ubicuos, encontrándose en toda célula eucariota. Entre otros componentes, los PB en líneas celulares contienen: XRN, exoribonucleasa 3´5 ´ citoplasmática, Dcp1a, enzima que cliva la estructura 5cap de los ARNm ; P54/RCK y Ge1/ Hedls, coactivadores del decaping. La presencia de PBs en las dendritas de neuronas hipocampales en cultivo esta siendo estudiada en nuestro laboratorio. Encontramos que los marcadores Dcp1a y Hedls forman foci en el cuerpo celular y dendritas de neuronas maduras. Dcp1a y Hedls colocalizan, lo cual es consistente con la complementariedad de sus funciones moleculares. Xrn1 mostró una localización subcelular radicalmente distinta, concentrándose en la cercanía de la sinapsis, en tanto que Dcp1a, P54 y Hedls se ubican en el tracto dendrítico y en la base de las espinas dendríticas. Esta distribución es específica de neuronas, ya que en líneas celulares Xrn1 colocaliza con Dcp1a, Hedls y P54 en los foci. Encontramos que los PB están diferencialmente localizados durante el desarrollo neuronal. Los cuatro componentes de PB, aparecen tempranamente en el soma y sus niveles incrementan durante la neuritogénesis, detectándose en dendritas a partir de los 15 DIV, coincidentemente con la expresión de sinapsina. Actualmente estudiamos la plasticidad de los componentes de PBs frente a diferentes protocolos de estimulación sináptica. Resultados preliminares muestran que los PB son sensibles a la estimulación por KCl. Financiamiento: ANPCyT; UBA y CONICET