Regulación de la virulencia de Xanthomonas campestris a través de la luz (Póster)

HERNÁN R. BONOMI; SEBASTIÁN KLINKE; FEDERICO COLUCCIO LESKOW; FLORENCIA MALAMUD; LISANDRO OTERO; GUSTAVO GUDESBLAT; LAILA TAUM; ADRIAN A. VOJNOV; JIMENA RINALDI; FERNANDO A. GOLDBAUM

Rosario

Congreso; Congreso Latinoamericano y Argentino de Microbiología 2016; 2016

Asociación Argentina de Microbiología y Asociación Latinoamericana de Microbiología

Xanthomonascampestris pv. campestris (Xcc), es una bacteria fitopatógena no fotosintética,responsable de generar la enfermedad vegetal conocida como la putrefacciónnegra de las crucíferas, distribuida a nivel mundial. En su genoma hay dossecuencias que codifican para proteínas fotosensoras, una posee un dominio LOV(sensores de luz azul) y la otra con un dominio de fitocromo (sensores de luzroja, XccBphP). En los últimos años fue creciendo la evidencia de que bacteriasno fotosintéticas utilizan la luz como señal. Como objetivo de este trabajo nospropusimos determinar la funcionalidad del fitocromo XccBphP. Para esto seestudiaron sus características fotoquímicas y la función que ejerce sobre lafisiología de la bacteria. Se expresó y purificó la proteína recombinante y serealizaron estudios de espectrofotometría donde se demostró que XccBphP escapaz de fotoconvertirse entre los dos estados característicos de losfitocromo, el Pr (absorbe el rojo) y el Pfr (absorbe el rojo‐lejano). Sedeterminó que pertenece al grupo de los bathy‐bacteriofitocromos cuyo estado dereposo es el Pfr. Con el objetivo de entender cuál es la función biológica deeste fotorreceptor se decidió realizar una mutante insertando en el gen quecodifica para XccBphP un cassette que confiere resistencia al antibióticoespectinomicina, la mutante generada, phy, no expresa la proteína. Además, estacepa fue complementada con un plásmido que contiene la secuencia silvestre(c‐phy) y con otro plásmido que posee una mutación puntual en el dominiofitocromo de la proteína (c13s‐phy). Se realizaron ensayos para determinar laproducción de xantano, principal factor de virulencia que posee esta bacteria,y se evaluó la habilidad de desarrollar un biofilm maduro de todas las cepas.Observándose una hiper producción de xantano y un biofilm más grande en la cepaphy y c13s‐phy en todas las condiciones lumínicas ensayadas. Se realizaronensayos de infección, de apertura estomática y de tinción de calosa, comparandola cepa silvestre, la mutante XccBphP y las cepas complementadas. Obteniéndosecomo resultado que al eliminar este fotorreceptor la bacteria se vuelve másvirulenta y que esto esta modulado por la luz a través de la funciónfotosensora del modulo del fitocromo. En conclusión, nuestros resultadossugieren que la luz sensada a través del bacteriofitocromo, es una importanteseñal que regula mecanismos asociados con la virulencia. La comprensión de lafotobiología de Xanthomonas y su relación con la virulencia puede ayudar en latarea de encontrar nuevas formas de interferir con su ciclo de infección.