Interacciones interespecies y formación de biofilms mixtos entre cepas con alta prevalencia en bacteriurias polimicrobianas asociadas al uso de catéteres

LUIS IELPI; ESTELA M. GALVÁN; CELESTE MATEYCA

Ciudad de Rosario, Pcia. de Santa Fé

Congreso; XXIII CONGRESO LATINOAMERICANO DE MICROBIOLOGÍA; 2016

Asociación Latinoamericana de Microbiología (ALAM)

La presenciade biofilms polimicrobianos sobre catéteres urinarios ha sido ampliamente reportada.Estudios epidemiológicos previos indicaron una alta prevalencia decoaislamientos de Klebsiella pneumoniae/Enterococcusfaecalis yK. pneumoniae/Proteusmirabilis enbacteriurias polimicrobianas de individuos que portan catéteres urinarios. Elobjetivo de este trabajo fue estudiar la dinámica de formación de biofilmsmixtos de K. pneumoniae/E. faecalis y K.pneumoniae/P.mirabilis,en condiciones similares a las presentes en catéteres urinarios, a fin deconocer si se establecen interacciones interespecies beneficiosas o perjudicialespara las bacterias involucradas.Materiales y métodos. Seutilizaron cepas provenientes de orina de individuos con catéter urinario, en dondese coaislaron K. pneumoniae/E. faecalis y K.pneumoniae/P.mirabilis.Se analizó la formación de biofilm y el crecimiento planctónico a partir deinóculos mixtos (en relación 1:1) e inóculos monomicrobianos en orinaartificial. Los biofilms se formaron sobre una superficie siliconada,reemplazando el medio de cultivo a 3 h postinoculación y cada 24 h. A distintostiempos, los biofilms fueron disgregados mecánicamente y las bacterias fueronenumeradas mediante plaqueo en LBagar conteniendo antibióticos selectivos. Deigual manera se determinó el número de células en medio líquido.Resultados. Lacoinoculación K. pneumoniae/E. faecalis sobre silicona no afectó laadhesión a la superficie ni el establecimiento de K. pneumoniae o E. faecalisen biofimsmixtos, en comparación a lo observado en los correspondientes biofilmsmonomicrobianos. Sin embargo, se observó incremento en el número de células viablesde K. pneumoniae y E. faecalis dispersadas en el medio apartir del biofilm (10 y 25 veces de aumento, respectivamente). Por otra parte,la coinoculación K. pneumoniae/P. mirabilis sobre silicona aumentó 6 vecesla cantidad de células de P. mirabilis formando biofilm, mientras que inhibiódrásticamente la adhesión de K. pneumoniae a la superficie. Más aún,el crecimiento planctónico de K. pneumoniae fue limitado durante lasprimeras 12 h post coinoculación y su viabilidad cayó 4 logs a las 24 h. Sibien P. mirabilis produjo alcalinización del mediodebido a la expresión de una potente ureasa (el pH máximo alcanzado fue de9.3), la caída en la viabilidad de K. pneumoniae no pudo ser atribuidasolamente a este cambio en el medio.Conclusiones. Estosresultados revelan distintos tipos de interacciones entre uropatógenos ensituación de cocolonización sobre catéteres urinarios. La formación de biofilmsmixtos de K. pneumoniae/E. faecalis incrementó el número debacterias obtenidas por dispersión desde el biofilm, mientras que lacoinoculación de K. pneumoniae/P. mirabilis favoreció el establecimientode P. mirabilis, y no de K. pneumoniae, bajo la forma de biofilm,provocando además una caída en la viabilidad de K. pneumoniae en cultivos líquidos.