La actividad de transporte del canal de Cl- CFTR, afectado en fibrosis quística, modula la actividad de la tirosina quinasa c-Src.

MARÍN, MARÍA C; VALDIVIESO, ANGEL G; TAMINELLI, GUILLERMO L; TEIBER, MARÍA L; PAGANO, ELEONORA S; SANTA COLOMA, TOMÁS A

Mar del Plata

Congreso; LIII Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2008

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

549 (522) LA ACTIVIDAD DE TRANSPORTE DEL CANAL DE CL- CFTR, AFECTADO EN FIBROSIS QUÍSTICA, MODULA LA ACTIVIDAD DE LA TIROSINA QUINASA C-SRC M C Marin 1 2 3, A G Valdivieso 1 2 3, G L Taminelli 1 2, M L Teiber 1 2, E S Pagano 1 2 4, T A Santa Coloma 1 2 3 4 1Fundación Instituto Leloir; 2Programa de Investigaciones Biomédicas, Facultad de Ciencias Médicas, Pontificia Universidad Católica Argentina UCA; 3Facultad de Ciencias Exactas y Naturales-UBA; 4Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires-CONICET. Estudiando la expresión diferencial de genes en fibrosis quística (FQ), previamente encontramos que la expresión y actividad de c-Src estaba aumentada en células FQ, en condiciones basales (JBiolChem 277:17239, 2002). Otros autores han encontrado que la estimulación de la actividad de c-Src, en condiciones no basales, se encuentra afectada en células FQ (JBiolChem, 278:8326, 2003). Nuestros objetivos son: determinar si los resultados previos obtenidos mediante la medición directa de la actividad de c-Src correlacionan con los que se pueden obtener con anticuerpos anti-phospho-tirosina específicos de c-Src, comprobar si los mismos resultados pueden obtenerse en otros modelos celulares y determinar el posible mecanismo de transducción de señales CFTR?c-Src. Se emplearon tres modelos de células FQ: 1) Células CFDE y CFDE/6RepCFTR, su versión corregida mediante la expresión ectópica de CFTR normal, 2) Células IB3-1 e IB3-1 corregidas mediante un vector viral (células S9) y 3) Células T84 que expresan CFTR wt y T84 tratadas con el inhibidor CFTR(inh)-172 (5µM). Mediante WB se observó en los tres modelos que la actividad de c-Src es mayor en las células FQ o con el CFTR inhibido. Se observó también, que al tratar células T84 con un cóctel estimulador de la actividad del CFTR (AMPc 200ìM, IBMX 200ìM e isoproterenol 20ìM), la actividad de c-Src fue menor que en las mismas células sin tratamiento. Cuando el CFTR fue estimulado y al mismo tiempo inhibido, en T84 y CFDE/6Rep, la actividad de c-Src fue similar a la observada en las mismas células controles. Se están estudiando los posibles mecanismos involucrados en la señalización. El aumento de la actividad de la tirosina quinasa c-Src en células FQ podría explicar, en parte, el mecanismo involucrado en la mayor proliferación celular observada por otros autores en cortes de tejido epitelial respiratorio humano FQ. Agradecimientos: subsidios UBA (X-156), ANPCyT (PICT 13907), becas del CONICET (MCM, ESP y AGV)) y UCA (GLT).