RESPUESTA AL ESTRÉS OXIDATIVO EN MOSCAS MUTANTES DE PIGMENTACIÓN

ROSSI, FABIANA A; RABOSSI, ALEJANDRO; BOCHICCHIO, PABLO A; TURDERA, L; QUESADA-ALLUÉ, LUIS A; PEREZ, MARTIN MARIANO

Posadas-Misiones

Congreso; IX CONGRESO ARGENTINO DE ENTOMOLOGIA; 2015

Sociedad Entomologica Argentina

En los insectos el metabolismo de N-βalanilderivados, que conjuga β-alanina con neurotransmisores, regula la coloración de la cutícula y los niveles de los mismos en el sistema nervioso. Las principales enzimas que participan en este metabolismo son la N-β-alanildopamina sintetasa (NBAD-S) y la Nβalanildopamina hidrolasa (NBAD-H), encargadas de sintetizar e hidrolizar, respectivamente, N-β-alanilderivados. Hemos postulado que el sistema NBAD-S/ NBAD-H participa inactivando y reciclando los neurotransmisores dopamina (DA), histamina, serotonina y octopamina, evitando el daño por estrés oxidativo y manteniendo los niveles de éstos, contribuyendo a la homeostasis del SNC. En Drosophila melanogaster los mutantes ebony (sin actividad NBAD-S y con actividad de NBAD-H) presentan niveles reducidos de NBAD y exceso de DA. En los mutantes tan (con actividad NBAD-S y sin actividad NBAD-H) los niveles de NBAD están aumentados y los de DA están disminuidos respecto a las moscas salvajes. Por otro lado, en Drosophila, la DA juega un rol regulatorio controlando el sueño y la actividad locomotora. Se ha postulado que el NBAD induce la actividad locomotora durante el día subjetivo (período de luz). En nuestro laboratorio hemos estudiado el patrón de sueño/actividad como indicador del correcto funcionamiento del SNC en moscas salvajes y los mutantes mencionados. Se conoce muy poco del mutante tan1. Los objetivos del trabajo fueron determinar si los N-β-alanilderivados promueven la actividad locomotora partiendo de la hipótesis de que el mutante tan1 incapaz de hidrolizar NBAD debería ser más activo. También se analizó si las alteraciones de los niveles de neurotransmisores / N-β-alanilderivados afectan a la homeostasis del SNC. Los principales parámetros estudiados fueron: niveles de actividad locomotora circadiana analizados utilizando monitores de actividad de Drosophila (DAM system, TriKinetics, Waltham, MA.), inducción de estrés oxidativo utilizando hematoporfirina IX, indicadores de respuesta al estrés oxidativo (capacidad antioxidante en SNC y expresión de enzimas del sistema antioxidante), análisis de la supervivencia en condiciones normales y bajo la inducción de daño oxidativo (moscas alimentadas con hematoporfirina IX) y metabolismo de NBAD (como indicador del reciclado de DA) en individuos salvajes y mutantes. Sorpresivamente, los mutantes tan1 mostraron una actividad locomotora menor y una supervivencia mayor que los de las otras dos cepas. Cuando fueron expuestos a una situación de estrés oxidativo, si bien las tres cepas presentaron una reducción en la supervivencia media y máxima, los machos de la cepa tan1 también presentaron una supervivencia mayor que los de las otras dos. La capacidad antioxidante total de la fracción hidrosoluble de homogenatos de tejido nervioso fue mayor para los insectos de la cepa tan1, que en las cepas salvaje y ebony1. También se determinaron los niveles de expresión de los ARNm de las enzimas antioxidantes. No se corroboró la hipótesis que postula que tan1 debería ser más activo que la cepa ebony1 y salvaje, sino que se observó lo contrario; este mutante es menos activo. La menor actividad locomotora de tan1 explicaría, en parte, su mayor supervivencia, ya que se producirían menor cantidad de radicales libres debido a la actividad metabólica más baja. Otra explicación posible a la mayor supervivencia (que no excluye a la primera), es que el sistema antioxidante de este mutante está incrementado.