Estudio de las características proliferativas de Phytomonas Jma y transfección con el gen de GFP

CARRILLO C; ZADIKIAN C; CÁNEPA GE; PEREIRA CA

Chascomús, Buenos Aires, Argentina

Congreso; XXIII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Protozoología; 2007

Sociedad Argentina de Protozoooigia (SAP)

El género Phytomonas agrupa tripanosomátidos que infectan diversas plantas de importancia económica. El estadío promastigote es cultivado axénicamente en medios GRACE y LIT. En este trabajo seguimos la proliferación de promastigotes de Phytomonas Jma en BHT y SDM79, que fue similar a la descripta en GRACE y LIT. Además, Phytomonas fue insensible a los inhibidores de biosíntesis de poliaminas DFMO o CHA por separado pero moderadamente sensible cuando se administraron simultaneamente; el antibiótico G418 fue letal. Habiendo determinado condiciones de selección se realizó una transfección con el gen de la GFP, clonado en los vectores pRibotex o pTrex. En ambos casos se vio similar eficiencia de transfección (aprox 2-3%) y similar disminución en viabilidad y capacidad proliferativa post-electroporación. En presencia de G418 el cultivo transfectado con pTrex-GFP recuperó su capacidad proliferativa luego de 15 - 20 días y expresó GFP, mientras que el electroporado con pRibotex-GFP no recuperó la proliferación. El estudio de Phytomonas sp. podría permitir la manipulacion de este parásito, por un lado, para mejorar el rendimiento de ciertos cultivos y, por otro, como herramienta para la expresión y caracterización de genes heterólogos.