Modelando epilepsia por reprogramación y diferenciación celular

MARIANA CASALIA; VERONICA CAVALIERE CANDEDO; RAMIRO QUINTA; JUAN CRUZ CASABONA; MARIA ISABEL FARIAS; JOAQUIN GONZALEZ; VALERIA ROCA; DOLORES GONZALEZ MORON; MARTA CORDOBA; GUSTAVO MOSTOSLAVSKY; JUANA PASQUINI; MARCELO KAUFFMAN; FERNANDO PITOSSI

Congreso; Reunion Anual Sociedad Argentina de Investigacion Clinica; 2014

La epilepsia afecta alrededor del 1% de la población mundial (1). Las terapias actuales se enfocan a actuar sobre los síntomas y no las causas, las cuales son mayormente desconocidas. La falta de modelos para su estudio es un obstáculo importante para la comprensión de esta enfermedad. La Epilepsia Focal Benigna de la Infancia (EBI) es el tipo de epilepsia más prevalente en la población pediátrica. Resultados aun no publicados ligan a mutaciones en el gen FGD6 con EBIs. El objetivo de este trabajo es intentar modelar las EBIs a partir de reprogramación y diferenciación de fibroblastos. Para ello, luego de la firma del debido consentimiento informado, fibroblastos de piel de 2 pacientes con EBIs con mutaciones en FGD6 en homocigosis, 2 controles familiares, asintomáticos, con mutaciones en FGD6 en heterocigosis y 1 control no relacionado fueron cultivados, reprogramados con el lentivirus STEMCAA (2) y diferenciados a neuroepitelio según un protocolo modificado de (3). Se obtuvieron y caracterizaron por lo menos 3 clones de células madre pluripotentes inducidas de cada muestra. La caracterización consistió en 9 ensayos que incluyeron pluripotencia por inmunocitoquímica (ICQ) y RT-PCR, diferenciación a endodermo, mesodermo y ectodermo por ICQ y RT-PCR e integración del transgén, entre otros. Los primeros resultados muestran que las células derivadas de pacientes con EBIs presentan alteraciones en su capacidad de diferenciación neuronal. Asimismo se observa que sus neuronas poseen un desarrollo axonal reducido. Estos resultados permiten inferir preliminarmente un retraso madurativo y/o en el proceso de diferenciación de neuronas provenientes de pacientes de esta enfermedad.