Utilización de BLS como sistema presentador de antígenos proteicos de Rotavirus bovino

BELLIDO D; CRAIG PO; MOZGOVOJ MV; GONZALEZ DD; WIGDOROVITZ A; GOLDBAUM FA; DUS SANTOS MJ

Vaquerías, Valle Hermoso, Córdoba, Argentina

Congreso; XXVII Reunión Científica Anual de SAV; 2007

Sociedad Argentina de Virologia (SAV)

La proteína lumazina sintetasa de Brucella spp. (BLS) presenta una estructura cuaternaria decamérica de gran resistencia la cual permite insertar dominios proteicos en sus 10 extremos amino terminales, dando como resultado proteínas quiméricas con un alto nivel de repetitividad y organización. Los dominios proteicos ensamblados a la estructura de BLS se convierten en potentes inmunógenos. En nuestro trabajo previo mostramos que es posible producir proteínas quiméricas estables y bien plegadas fusionando BLS con el dominio interno de la proteína VP8 de Rotavirus bovino (RVB), VP8d, el cual está demostrado que conserva tanto la estructura compacta característica, como la totalidad de los epitopes neutralizantes descriptos hasta el momento. La inmunogenicidad de la proteína quimérica fue evaluada en el modelo de ratón lactante. Para ello, grupos de 8 hembras fueron inoculados con: BLS-VP8d, VP8d, BLS + VP8d (sin fusionar) y BLS. Se probaron 3 dosis diferentes de VP8d, en estado monomérico o formando parte de la proteína quimérica: 2 mg, 0,75 mg y 0,25 mg. La producción de anticuerpos se evaluó utilizando un ELISA directo desarrollado para tal fin. A su vez se realizaron ensayos de seroneutralización viral para verificar la presencia de anticuerpos neutralizantes. Para las tres dosis evaluadas, las hembras inmunizadas con BLS-VP8d presentaron un título de anticuerpos medidos por ELISA y de anticuerpos neutralizantes significativamente superiores a los del grupo inmunizado con VP8d monomérica. Además presentaron el 100% de protección en todas las dosis, mientras que los animales inoculados con VP8d en estado monomérico presentaron un porcentaje de protección del 35%. Estos resultados demuestran que es posible la utilización de BLS como sistema presentador de antígenos proteicos y refuerzan la posibilidad de utilizar a VP8d como vacuna contra RVB.