Factores de inhibición lipídica secretados por células epiteliales mamarias: efecto sobre diferenciación de adipocitos y metabolismo oxidativo

DAIANA SAPOCHNICK; GRACIELA PIWIEN PILIPUK; MARÍA CROCE; JUAN CARLOS CALVO; LILIANA N. GUERRA

Mar del Plata

Congreso; LIIReunión Científica Anual de la SAIC; 2007

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

Factores proteicos derivados de células epiteliales mamarias murinas (NMMG) inhiben la acumulación de lípidos en adipocitos 3T3-L1. Aquí estudiamos su efecto temporal sobre 3T3-L1 y adipocitos primarios de ratón CF1, como también la expresión del factor de diferenciación c/EBP beta y metabolismo oxidativo. Medio condicionado de NMMG (MC),  se obtuvo en SFB al 1%. Las células se cultivaron hasta 80% confluencia y diferenciaron (isobutilmetilxantina, dexametasona e insulina) en presencia o ausencia de MC y/o en presencia o ausencia de N-acetilcisteína (NAC). Control positivo (CP): células diferenciadas. Los triglicéridos (Tg) fueron índice de diferenciación. La diferenciación de 3T3-L1 produjo 2.74 + 0.49 ugTg/ug prot (basal 0.45 + 0.21 ug Tg/ug/prot). Tratamiento con MC al momento de comenzar la diferenciación (to) o después de 24h (t24) provocó inhibición (p<0.01) de la producción de Tg (0.49 + 0.02 y 0.61 + 0.02 ug Tg/ug prot respectivamente). La diferenciación del cultivo primario produjo una acumulación significativa de Tg (CP: 0.18 + 0.02 vs control: 0.08 + 0.01 ugTg/ug prot p<0.01). MC inhibió la acumulación lipídica (61 % vs CP), mostrando efecto temporal en su inhibición (to: 53% y t24: 64% de inhibición). Resultados muestran que la expresión de c/EBP disminuye en presencia del factor (Western blot). El tratamiento con NAC inhibió la acumulación de lípidos a 10uM: CP vs CP + NAC: 46.7 + 2.3 %, p < 0.05; a 5uM de NAC o en conjunto con MC no se observaron diferencias versus CP. MC actuaría tempranamente sobre la acumulación lipídica, posiblemente modificando expresión de factores de transcripción. Si bien NAC evitaría la acumulación de lípidos no se observó efecto sinérgico con MC, sugiriendo otra vía de acción.