Relación entre receptores de progesterona (RP), reclutamiento estromal y expresión de CXCL12 en el crecimiento in vivo de una línea de carcinoma mamario murino MC4-L5

CAROLINE LAMB; EDGARDO SALVATIERRA; VICTORIA FABRIS; CLAUDIA LANARI; OSVALDO PODHAJCER

mar del plata

Congreso; SAIC; 2007

Demostramos que la línea celular MC4-L5 transfectada en forma estable con una secuencia shRNA capaz de inhibir al mRNA del RP (O6), detiene su crecimiento in vivo comparada con la línea sin transfectar (Wt) o transfectada con el vector vacío (pCMV). Sólo los tumores Wt o pCMV mostraron además de las células epiteliales tumorales la presencia de células ahusadas entremezcladas. Para investigar las causas de estas diferencias, evaluamos 1) el rol del sistema inmune, 2) la estirpe de la población de morfología ahusada, 3) la expresión del factor CXCL12 y su receptor CXCR4 en extractos tumorales. Se transplantaron los 3 tipos celulares en ratones nude (n=12). A los 44 días post-inóculo la línea Wt alcanzó un tamaño tumoral de 62+-42 mm2, la pCMV 42+-17 mm2 y la O6 estancó su crecimiento en 13+-8 mm2 (p<0.05). Estos resultados fueron similares a los obtenidos en ratones BALB/c sugiriendo que el crecimiento diferencial no es consecuencia de la respuesta inmune del huésped. Estudiamos la estirpe de la población ahusada inoculando en ratones BALB/c machos la Wt (hembra) y detectamos el estroma tumoral por FISH usando sondas específicas para el cromosoma Y en conjunción con anticuerpos anti citoqueratina por fluorescencia. El análisis de los resultados por microscopía confocal sugiere que las células ahusadas son del huésped. La expresión de la isoforma de 40 kDa del CXCR4 no varió mientras que, el CXCL12, evaluado por Western blot en extractos tumorales normalizados por contenido de caderina E, fue mayor en la línea O6 (p<0.05) que en las líneas control. Los resultados demuestran que la inhibición del crecimiento tumoral no se debe a la respuesta inmune del huésped. La asociación entre baja expresión de RP,  aumento de expresión de CXCL12, falta de reclutamiento de estroma y disminución de crecimiento tumoral sugieren el rol fundamental del RP en el crecimiento in vivo de esta línea celular y que este participaría del reclutamiento estromal regulando la expresión de CXCL12.