IIBBA   05544
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES BIOQUIMICAS DE BUENOS AIRES
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
BLS induce la presentación cruzada de péptidos de manera TLR4-independiente y una respuesta citotóxica específica dependiente de TLR4
Autor/es:
PAULA M. BERGUER; ANDRÉS HUGO ROSSI; VANINA A. ALZOGARAY; ISABEL PIAZZON; FERNANDO A. GOLDBAUM
Lugar:
Mar del Plata
Reunión:
Congreso; LX Reunión científica anual de la sociedad Argentina de inmunología - SAI; 2012
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Inmunología
Resumen:
La lumazina sintetasa de Brucella spp. (BLS) es una proteína decamérica muy inmunogénica. Su estructura permite la inserción de péptidos en sus 10 extremos N-terminales y estas quimeras generan inmunidad oral y sistémica sin adyuvantes. BLS activa células dendríticas (CD) e induce su reclutamiento vía TLR4. A diferencia de otras vacunas basadas en subunidades, BLS induce la presentación de péptidos acoplados a su estructura activando a los linfocitos CD8+ e induciendo una importante actividad citotóxica específica aún sin adyuvantes. En este trabajo evaluamos el rol de TLR4 en ambos eventos. Se incubaron CD purificadas de bazo de ratones que no expresan un TLR4 funcional (C57Bl/10ScNJ) con la quimera BLS-OVA257-264 y se cocultivaron con linfocitos CD8+ de ratones OT-I ?que reconocen a OVA257-264 en MHCI- marcados con CFSE. Luego de 18hs se analizó mediante citometría de flujo la disminución de marca de CFSE como medida de proliferación y la expresión de CD69 como medida de activación temprana. Las CD de ratones C57Bl/10ScNJ  indujeron niveles de proliferación de CD8+ similares a las CD de ratones normales (%CD8+ que proliferaron: ScN 34.2±5 vs wt 34±2.3). En ambas cepas el % de CD8+ OT-I que expresan CD69 aumentó de manera similar (ScN 87.9±3 vs wt 87±1). Es decir que la presentación cruzada inducida por BLS no depende de TLR4. Por otro lado, se inmunizaron ratones C57Bl/10ScNJ y normales con BLS-OVA257-264 y se inocularon con esplenocitos preincubados con OVA257-264. El porcentaje de citotoxicidad específica en los ratones normales a las 18hs resultó de 38±1; BLS-OVA257-264 no indujo citotoxicidad en los ratones C57BL/10ScNJ. Nuestros resultados muestran que TLR4 es necesario para la citotoxicidad específica inducida por BLS-OVA257-264. La capacidad de BLS para inducir la presentación cruzada de OVA257-264 no se basa en su capacidad de señalizar a través de TLR4; la inducción de presentación cruzada no determina la generación de una respuesta citotóxica.