IIBBA   05544
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES BIOQUIMICAS DE BUENOS AIRES
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Mecanismo de propagación de la señal inducido por la luz en el dominio LOV del fotorreceptor LOV-HK de Brucella abortus ¿Qué aprendimos a través de la espectroscopía RMN
Autor/es:
MARIANA GALLO; JIMENA J. RINALDI; HERNÁN R. BONOMI; SEBASTIAN KLINKE; GASTON PARIS; FERNANDO A. GOLDBAUM; DANIEL CÍCERO
Lugar:
Buenos Aires
Reunión:
Conferencia; XL Reunión Anual de Biofísica; 2011
Resumen:
Los dominios LOV (Light-Oxigen-Voltage) son módulos activados por luz que forman parte de una gran familia de proteínas sensoras. Estos dominios usan flavinas como cofactores para detectar cambios en la luz azul y controlar un amplio rango de funciones efectoras, que incluyen quinasas, unión al DNA y respuesta al estrés, entre otras. Al ser iluminados, los dominios LOV producen aductos proteína-flavina cuya formación induce cambios conformacionales que son transmitidos al dominio efector. Aún no se conocen las bases moleculares por las cuales este dominio es capaz de influir sobre una tan amplia variedad de funciones. Para comprender este mecanismo estudiamos el dominio LOV de la histidina quinasa regulada por luz de Brucella abortus1 (LOV-HK). Esta bacteria es el agente etiológico de la brucelosis, una enfermedad zoonótica. Mutantes de Brucella que carecen del gen LOV-HK presentan una virulencia atenuada, al igual que la cepa salvaje crecida en condiciones de oscuridad. Estos hallazgos demuestran que la luz es un factor que condiciona la virulencia bacteriana y que dicho efecto está mediado por el fotorreceptor LOV-HK. La estructura de rayos X del dominio LOV en el estado oscuro muestra la esperada topología a/b. El dominio aislado existe como dímero en la estructura cristalina. Con el fin de explorar los cambios conformacionales inducidos por la luz en solución, utilizamos espectroscopía RMN. Medidas de difusión y de dinámica indican que, en solución, este dominio LOV es también un dímero. La luz induce cambios en los desplazamientos químicos de varias regiones adyacentes a la molécula de FMN. Aunque los cambios conformacionales no parecen ser masivos, hay una desestabilización del dominio debida a la iluminación. Nuestros resultados apuntan a un rol importante de la lámina b del dominio LOV en el mecanismo de propagación de la señal.