Phytomonas Jma: relación entre niveles de poliaminas, biosíntesis y transporte según las condiciones de cultivo

MOROSI L.G; BARCLAY J.J; MARCORA M.S; GONZALEZ N.S.; ALGRANATI I.D; CARRILLO C

Mar del Plata

Congreso; IX CONGRESO ARGENTINO DE PROTOZOOLOGIA Y ENFERMEDADES PARASITARIAS; 2011

Phytomonas es un tripanosomátido patógeno de plantas, que afecta especies de interés agro-industrial (ej: tomate, coco, productoras de látex). Phytomonas Jma 066, utilizada en este trabajo, ha sido aislada de látex de Jantropha macrantha. Las poliaminas son compuestos esenciales para la proliferación celular; siendo putrescina (PUT) y espermidina (SPD) las poliaminas más abundantes en tripanosomátidos. PUT es sintetizada a partir de ornitina, vía ornitina decarboxilasa (ODC); PUT, a su vez, es sustrato de la SPD-sintasa que sintetiza SPD. En trabajos previos vimos que las poliaminas, particularmente SPD, son necesarias para la proliferación de Phytomonas Jma 066. En este trabajo profundizamos el estudio de la biosíntesis y transporte según la fase y condiciones del cultivo. La capacidad proliferativa de Phytomonas Jma 066 fue similar en medio rico (BHT) y medio pobre en poliaminas (SDM79) (densidad máxima de 80- 100x106células/ml). La actividad de ODC en fase logarítmica presentó valores de 12 nmol/h/mg proteínas en medio SDM (donde la única fuente disponible de poliaminas es la síntesis), valores 2-3 veces mayores que en BHT, donde el transporte es una fuente efectiva de poliaminas. La actividad ODC en ambos medios cayó aprox a un 10% en fase estacionaria; en contrapartida la concentración endógena de PUT (3,4± 0,14 nmoles/108células en fase logarítmica en medio BHT) presentó un aumento en fase estacionaria temprana (con una posterior reducción en fase estacionaria tardía). Dicho aumento de PUT se justifica, al menos en parte, por aumento en el transporte desde el medio; no se descarta que otros mecanismos como la disminución del consumo o el aporte de PUT desde reservorios celulares también estén involucrados. En medio SDM no se vio ese aumento de PUT en fase estacionaria temprana; en paralelo, no se evidenciaron diferencias en el transporte. En el caso de SPD, en medio SDM la concentración endógena en fase logarítmica (12,01± 0,98 nmoles/108células) disminuyó un 30% en fase estacionaria; disminución poco evidente en BHT. En ensayos de transporte en fase logarítmica, SPD se transportó más activamente en medio BHT que en SDM. En fase estacionaria temprana, el transporte de SPD en medio SDM se vio 1,5 a dos veces aumentado (donde disminuía su concentración endógena), sugiriendo que el transporte podría estimularse en respuesta para compensar las concentraciones endógenas. Concluyendo, Phytomonas obtiene PUT y SPD por biosíntesis y por transporte, de modo diferencial según la fase y condiciones del cultivo.