IIBBA   05544
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES BIOQUIMICAS DE BUENOS AIRES
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Importancia funcional de Heterochromatin Protein (HP) 1gama en el proceso de miogénesis
Autor/es:
NANCY CHARO; NATALIA M. GALIGNIANA; SEBASTIAN SUSPERREGUY; JUDITH TONEATTO; GRACIELA PIWIEN PILIPUK
Lugar:
Mar del Plata
Reunión:
Congreso; LVI Reunion Anual de la Sociedad Argentina de Investigacion Clinica; 2011
Institución organizadora:
SAIC
Resumen:
En estudios recientes demostramos que al inducir la diferenciacion de preadipocitos 3T3-L1, la proteina nuclear no histonica HP1gama se concentra transitoriamente en el polo opuesto al MTOC. Nos preguntamos entonces si la polarización nuclear de HP1gama ocurría en otros procesos de diferenciación celular, y para ello analizamos la distribución subcelular de HP1gama durante el proceso de miogénesis. Empleando inmunofluorescencia indirecta (IFI) y microscopía confocal observamos que en mioblastos C2C12, HP1gama se localiza en regiones nucleares eucromáticas y heterocromáticas. Llamativamente, luego de 4 días de inducida la diferenciación, HP1gama, una proteína sólo descripta en el núcleo hasta el presente, se localiza mayormente en el citoplasma de los miotubos. HP1gama colocaliza parcialmente con fibras de actina y una fracción se detecta en la región del sarcolema. En cambio, HP1gama, otro miembro de la familia de las HP1 altamente homóloga, se encuentra presente en el núcleo tanto de mioblastos como de miotubos. Análisis por Western blot (WB) de las fracciones nuclear y citoplasmática de miotubos C2C12 demuestra que HP1gama se encuentra en ambas fracciones. En miofibrillas aisladas así como en cortes histológicos de musculo estriado de ratón, observamos que HP1gama se localiza en las bandas Z y en el sarcolema. Para investigar la importancia funcional de HP1gama durante el proceso de miogénesis, se generaron mioblastos C2C12 en los que se interfirió la expresión de HP1gama de manera estable empleando shRNA. Las C2C12HP1gama-/- no se diferenciaron o dieron origen a miosacos, células en las que las fibras de actina no se han formado apropiadamente y los núcleos se acumulan perdiendo la distribución organizada que se observa en el miotubo normal. En síntesis, HP1gama experimenta cambios dinamicos en su distribución subcelular durante el proceso de miogénesis cumpliendo un rol esencial en la correcta formacion del miotubo.