Identificacion, clonado y caracterizacio del primer transportador de poliaminas en Trypanosoma cruzi: TcPAT1

CARRILLO C, CANEPA GE, ALGRANATI ID, PEREIRA CA.

Huerta Grande, Cordoba, Argentina

Congreso; XXI Reunion Cientifica Anual de la Sociedad Argentina de Protozoooig¨ªa (SAP); 2006

Sociedad Argentina de Protozoooigia (SAP)

Los sistemas de transporte en parasitos complementan la falta de numerosas rutas biosint¨¦ticas y funcionan como sensores celulares que les permiten adaptarse al cambiante medio extracelular; por ello resultan blancos terapeuticos atractivos. A pesar de la importancia de los sistemas de transporte en tripanosomatidos, dichos transportadores solo se han caracterizado bioquimicamente hasta el presente. Las poliaminas (putrescina, espermidina y espermina) son esenciales para la proliferacion de T. cruzi. Puesto que este parasito es naturalmente auxotrofo para poliaminas, depende estrictamente del transporte de poliaminas desde el medio extracelular. Recientemente identificamos en el genoma de T. cruzi una secuencia, TcPAT12, incluida dentro de la familia de transportadores putativos de aminoacidos; este podria ser un transportador de poliaminas pues presentaba una notable homologia con el transportador descripto en L. major. El analisis de su secuencia predijo nueve sitios transmembrana. Clonamos dicho gen y realizamos estudios de caracterizacion bioquimica y fisiologica del transportador en su contexto celular asi como tambien expresandolo en sistemas heterologos. La expresion de TcPAT12 en ovocitos de Xenopus laevis indicaron que el producto de este gen era un transportador de alta afinidad por espermidina; tambien transporto putrescina y L-arginina, con menor afinidad. La constante de afinidad (Km) por espermidina tanto en ovocitos microinyectados con TcPAT12 como en epimastigotes de T. cruzi fue de aproximadamente 14 uM, valor similar al descripto para el transportador de L. major. La identificacion in silico de secuencias con cierto grado de homologia a TcPAT12 sugieren la existencia de otros posibles transportadores de poliaminas o moleculas relacionadas que estan siendo estudiadas actualmente.