Estudio de la toxicidad diferencial causada por péptidos amiloides asociados a demencias humanas en Drosophila melanogaster.

MARCORA M.S; AVENDAÑO- VAZQUEZ. L.A; CERIANI M.F; CASTAÑO. E.M

Congreso; Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigaciones Clinicas (SAIC; 2011

Un grupo creciente de enfermedades neurodegenerativas está asociado a la acumulación de péptidos amiloides en el cerebro adulto. En la enfermedad de Alzheimer se encuentran depósitos del péptido Abeta y en las demencias de tipo Británico y Danés se acumulan los péptidos ABri y ADan, respectivamente. Estos se generan por mutaciones en el gen BRI, cuya forma salvaje produce un péptido no tóxico, p23. Trabajos previos indican que Abeta causa neurodegeneración en el cerebro de Drosophila melanogaster (Dm). Con el objetivo de comparar las toxicidades causadas por Abeta, ABri y ADan, se generaron líneas transgénicas de Dm mediante la inserción sitio-dirigida del transgén. Para su expresión tejido-específica usamos el sistema UAS-Gal4. Se clonaron en el vector pUAST attb las secuencias de Abeta, ABri, ADan y p23 río abajo de la secuencia de secreción del gen necrotic de Dm para dirigir los péptidos a la vía secretoria. Su expresión en el ojo (GMR) y en el SNC (elav) mediada por drivers específicos se corroboró por inmunofluorescencia y Western blot. No se observó toxicidad en animales expresando 1 copia de cada transgén. Sin embargo, con 2-3 copias se evidenció toxicidad, desde el típico ojo rugoso (degeneración de omatidias, desaparición de quetas sensoriales, etc) en los ojos de moscas Abeta (85% vs p23 p<0,01), hasta desarreglos en parches para ABri y ADan (30-40%). Estas observaciones se correspondieron con defectos en la estructura de la retina analizados mediante cortes histológicos. Llamativamente, en las líneas ABri y ADan, la toxicidad fue mayor con 2 copias que con 3. Nuestros resultados indican una mayor toxicidad por parte de Abeta, mientras que la sobre-expresión alta de ABri y ADan podría estar favoreciendo una mayor agregación a expensas de formas solubles más tóxicas. Este modelo permitirá estudiar y comparar los mecanismos subyacentes a las toxicidades diferenciales y realizar un “screen” de genes que modulen la vulnerabilidad neuronal a los distintos péptidos.