Cambio conformacional y agregación de D78D, una variante dimérica todo-beta de IFABP

CARLA R. ANGELANI; INES S. CABANAS; CARAMELO J; DELFINO J; LUCRECIA M. CURTO

Buenos Aires

Congreso; XL Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Biofísica; 2011

Sociedad Argentina de Biofísica

La exposicion de IFABP a proteasas permite identificar fragmentos que preservan estructura y funcion. Asi, por la accion de clostripaina se obtuvo Y98Y, y a partir de ella, Y78Y, un fragmento limite correspondiente al segmento 29-106 de IFABP. Y78Y resulta soluble, estable y forma un dimero levemente expandido que conserva la funcionalidad de la proteina original1. Por su estrecha relacion con IFABP y contar con caracteristicas estructurales unicas, esta proteina nos permite evaluar comparativamente como la accion de un agente perturbador -como es el trifluoroetanol (TFE)- impacta sobre la conformacion y la tendencia a la agregacion de un motivo todo-β. La posibilidad de formar agregados de tipo amiloide se examino por su capacidad de unir los colorantes Tioflavina-T y Congo Red, y mediante microscopia electronica de transmision (TEM). La medida de la absorcion aparente a 350 nm a distintas concentraciones de TFE (0 – 70 % v/v) revela un maximo de agregacion a 25 %. Asimismo, la union a colorantes muestra un perfil similar al obtenido por turbidimetria, indicando que los agregados resultantes tendrian caracteristicas de tipo amiloide, conclusion apoyada por los resultados de TEM que revelan ausencia de agregacion amorfa. Independientemente, datos de espectroscopia optica (dicroismo circular y fluorescencia) dan cuenta de la modulacion conformacional inducida por TFE.