Doctor en Ciencias Biológicas con Orientación en Biología Celular y Molecular
Licenciada en Biología Molecular

PROFESIONAL PRINCIPAL

-Organización de una jornada de actualización de PCR en tiempo real para tesistas e investigadores del instituto y docentes de la FQByF (UNSL). -Organización de una jornada de capacitación en el uso del software del equipo CFX96 Touch Real-Time PCR Detection System (BioRad) que se adquirió en el marco del proyecto institucional: Implementación DE HERRAMIENTAS para Diagnóstico, epidemiología Y OTRAS NECESIDADES DE LA PROVINCIA DE SAN LUIS. -Desarrollo e implementación de protocolos de RT-qPCR para detección simultánea de virus respiratorios Luego de la pandemia Covid y tras el relajamiento en las normas de cuidado (uso de barbijo, distanciamiento social, ventilación de ambientes, etc), a inicios del 2022 comenzaron a circular en mayor medida los virus respiratorios estacionales, olvidados durante los últimos años. Sumado a que la sintomatología que causan es similar a una infección por SARS-Cov2, nos pareció apropiado implementar una tecnología para la detección simultánea de los virus respiratorios más relevantes clínica y epidemiológicamente (SARS Cov2, Influenza A y B, Virus Sincitial Respiratorio, entre otros) en un formato modular flexible y adaptable a diferentes necesidades. Para ello propusimos modificar protocolos estándar de detección de SARS Cov 2, Influenza A, Influenza B y Virus Sincitial Respiratorio (RSV), generando reacciones en formatos modulares que pudieran ser adaptadas en diferentes combinaciones. Para ello, adquirimos sondas de hidrólisis (TaqMan) para SARS Cov2 marcadas con el fluoróforo Texas Red y para Influenza A marcada con HEX. Como control de calidad utilizamos la detección de RNAsa P (marcada con Cy5) que fue un ensayo optimizado y descripto oportunamente en el informe anterior. Se validaron las sondas adquiridas en ensayos comparativos, demostrando que la detección con ambas sondas, Texas Red (SARS-CoV2) y HEX (Influenza A), presentan la misma eficiencia y sensibilidad que las realizadas con las sondas convencionales marcadas con FAM. Actualmente nos encontramos trabajando en la optimización del multiplexado de las detecciones de SARS-Cov2, Influenza A y Virus Sincitial Respiratorio conjuntamente con el gen control lo que nos permitirá evitar el diagnóstico de falsos negativos. Alcanzado este objetivo se trabajará en el multiplexados de SARS-Cov2/Influenza A/ Influenza B/ RNasa P. La optimización de éstos ensayos se reflejará en una disminución en la complejidad y tiempo de procesamiento de las muestras así como también en una sensible disminución en el costo de los ensayos diagnósticos. En este proyecto se encuentra actualmente trabajando una estudiante en el marco de una pasantía de la cual soy directora (RD02 - 765 / 2022). -Implementación y optimización del ensayo diagnóstico para detección de E. coli productor de toxina Shiga. Las Enfermedades Transmitidas por Alimentos (ETA) se originan por la ingestión de alimentos contaminados con agentes biológicos y/o químicos. Los agentes biológicos (bacterias, hongos, virus y parásitos) constituyen la causa más frecuente de las ETAs. Entre las principales bacterias causantes de ETA se encuentra E. coli productor de toxina Shiga. Por ello a finales de 2021 comenzamos a diseñar un ensayo que nos permitiera detectar en una sola reacción la presencia de E. coli productora de Shiga toxina mediante la detección de sus principales genes de virulencia: stx1, stx2 y eae (https://doi.org/10.1016/j.mcp.2003.12.004). Para ello se diseñaron oligonucleótidos y sondas específicas capaces de detectar los 7 subtipos de Stx2 (variantes stx2a-stx2g) y los tres subtipos de stx1. Todos estos ensayos se realizan en concordancia con las normas internacionales. Actualmente nos encontramos trabajando en el multiplexado de la reacción y en el desarrollo de un ensayo control que nos permita descartar los falsos negativos en alimentos provenientes de carne vacuna y cerdo. Las tareas hasta aquí realizadas forman parte del trabajo de tesis para optar al grado de Licenciada en Biología Molecular de la estudiante Romina Garraza (RD02 - 676 / 2022). -Las metodologías desarrolladas serán transferidas a quienes lo soliciten. -Se participará de jornadas y congresos. Las siguientes tareas se realizarán a demanda de los grupos de investigaciónn del instituto: -Se planea trabajar conjuntamente con investigadores y becarios en el diseño, optimización e implementación de PCR en tiempo real en reemplazo de PCR convencional. -Asimismo se asesorará y capacitará a investigadores y becarios del instituto en el uso de sondas fluorescentes y multiplexado para detección de expresión génica en ensayos de PCR en tiempo real. -Se realizarán tareas de generación y transformación de bacterias quimio y electrocompetentes. -Se realizarán servicios de identificación molecular de organismos mediante DNA Barcode.

ENRIZ, RICARDO DANIEL / INV PRINCIPAL

[IMIBIO-SL] INSTITUTO MULTIDISCIPLINARIO DE INVESTIGACIONES BIOLOGICAS DE SAN LUIS -
[CCT SAN LUIS] CENTRO CIENTIFICO TECNOLOGICO CONICET - SAN LUIS -
[CONICET] CONSEJO NACIONAL DE INVESTIGACIONES CIENTIFICAS Y TECNICAS -